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上海酶聯(lián)Elisa試劑盒檢驗方法
更新時(shí)間:2024-06-25   點(diǎn)擊次數:141次

Elisa試劑盒以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在上得到了廣泛的應用,然而實(shí)驗新手們面對各種各樣、動(dòng)則上上千種的Elisa試劑盒,內心應該是崩潰的。

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Elisa試劑盒的操作

(一)檢驗方法

1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘,恢復至室溫。

2.取所需用量酶標板條,設空白對照1孔、陰性/陽(yáng)性對照各2孔,未用的板條盡快密封,2~8℃保存。

3.空白對照孔加樣品稀釋液100μl;陰、陽(yáng)性對照孔分別加入陰、陽(yáng)性對照100μl;樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100μl。

4.混勻,置37℃反應30分鐘。

5.扣去孔內液體,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置30秒后棄去,重復洗滌5次,拍干。

6.每孔加酶標記物100μl(空白孔除外)。置37℃反應30分鐘。

7.洗滌,同步驟5。

8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl,混勻,37℃避光反應10分鐘。

9.每孔加終止液50μl,混勻,用空白孔調零,于450nm(可用630nm作參比波長(cháng))測定各孔吸光值(A值)。

(二)樣品準備

1.取動(dòng)物全血按常規方法制備血清,要求血清清亮,無(wú)溶血、無(wú)污染。樣品1周內可于2~8℃保存,長(cháng)期需置-20℃保存。

2.用樣品稀釋液將待檢血清按100倍稀釋(2μl血清加入198μl樣品稀釋液中,混勻)。陰、陽(yáng)性對照不用稀釋。

3.濃縮洗滌液使用前應恢復至室溫使沉淀溶解,然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋。

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